细胞的保存和运输
细胞治疗涉及细胞采集、培养扩增、基因修饰、细胞回输/移植治疗这几个过程。通常,这些过程的实施地点或者时间并不一致,治疗用细胞会在不同地点、不同时间点之间运输。很多治疗机构仅在细胞回输/治疗前对送达的细胞产品进行质控,容易忽视整个运输过程中的细胞质控和管理。即从细胞采集到最终治疗,所有保存和运输环节都应当执行标准化操作和管理。
冷冻保存和运输
在常温或37℃环境中,细胞内各种酶和其他生物大分子大分子反应、代谢旺盛,耗氧高,能耗大。这些生理过程会产生的大量氧自由基和脂质过氧化物。它们必须及时被清除,否则引起环境pH和渗透压变化,造成细胞溶胀和死亡。由于不方便同时提供过多细胞培养基以及大量代谢所需氧气,细胞的远途运输通常采用低温或者冷冻方法。
冷冻运输一般使用干冰或者液氮维持细胞冷冻。冷冻状态下,细胞停止生命活动,没有代谢,进入“休眠”。送达的细胞接下来会被复温,“苏醒”。复温操作者必须谨慎,避免从“休眠”至“苏醒”过程中的操作对细胞造成不可逆的损伤。冷冻运输对运输条件要求非常苛刻,并且运输成本高昂。因此,虽然冷冻运输是较完美的运输解决方案,细胞活性能长期得到保存,实际应用中却难以广泛采用。
低温保存和运输
除了停止细胞代谢,还可以通过降低代谢达到短期保存细胞的目的,即——低温保存和运输。低温(0~10℃)处理可降低细胞正常生理过程中产生的氧自由基和脂质过氧化物。送到的细胞无需特别处理,ready-to-use。并且,低温运输与冷冻运输相比,非常廉价。
低温运输需要特别的溶液。如果使用普通缓冲盐溶液,它的有效性不能保证。临床治疗用的细胞不能接触动物源成分,如血清和成分来源不明的蛋白和氨基酸。如果使用细胞培养基,安全性与稳定性堪忧。因此,为保障细胞的低温保存和运输,一种能够安全、稳定、高效保存细胞活性的溶液非常重要。
CellMateTM1701和1702
CellMateTM是完全化学成分的细胞活性保存液,含高效pH缓冲液、多种渗透压稳定剂和多种氧自由基清除剂,添加了细胞维持基本代谢所需的能量底物。运输过程中,细胞维持低代谢状态,受到CellMateTM的稳定保护长达5天。CellMateTM1702是增效型运输保存液,比CellMateTM1701添加了更珍贵的保护成分,适用于对低温极其敏感、容易损伤的细胞类型。
产品功能
CellMateTM能够高效地保存活性细胞。
CellMateTM(TM1701)说明书
【用途】
本品完全化学配方,不含任何动物源或人源成分,用于保存活细胞,可稳定、有效地保存细胞活性72小时。
【性状】
无菌分装的无色至浅黄色澄清水溶液。
【保存】
注意避光。收货后低温存放。于4℃储存,自生产之日起2个月内有效;于-20℃储存,自生产之日起2年内有效。
【使用方法】
1. 检查并确认细胞没有真菌、细菌、支原体污染。
2. 使用前,检查CellMate是否超过保质期。于4℃储存的CellMate如果已变为浅褐色甚至棕色,表明已失效。于-20℃储存的CellMate解冻后,有少许白色沉淀,应当待沉淀物完全溶解后,再充分混匀溶液,待分装使用。
3. 使用前,应将本品预冷至2~8℃,被保存的细胞在储存和运输全程应监测温度,维持在2~8℃。
4. 若保存的细胞为贴壁状态,待细胞生长至汇合率50%~90%时,加入适量体积的CellMate(>=同等情况下添加的细胞培养基体积)等。密封容器后,水平放置容器,再运输和储存。
5. 若保存的细胞为悬浮状态,应先计算细胞数量,以适宜的密度将细胞重悬于CellMate中。然后,准备适量体积的容器,使容器留存1/3~2/3容积的空气,再将细胞重悬液移至容器中密封。
参考重悬密度:间充质干细胞系1~2.5×105/mL,Jurkat细胞系4~6×105/mL。其他类型的细胞(系),使用者应先测试并确保CellMate有效后再常规使用。
6. 收到细胞后,贴壁保存的细胞直接弃去CellMate,无需冲洗,可直接继续培养、传代或作其它用途。
7. 收到细胞后,悬浮保存的细胞直接180g离心5~10min后,弃去CellMate即可。
8. 本品仅供研究使用。
细胞运输液 | CellMate | 普通细胞运输保存液 | CM1701 | 20ml/支 |
CellMate | 增效细胞运输保存液 | CM1702 | 20ml/支 |