非洲猪瘟（英文名称：African Swine fever，简称：ASF）是由非洲猪瘟病毒（英文名称：African Swine fever virus，简称：ASFV）感染家猪和各种野猪（如非洲野猪、欧洲野猪等）引起一种急性、出血性、烈性传染病。其特征是发病过程短，最急性和急性感染死亡率高达100%，临床表现为发热（达40~42℃），心跳加快，呼吸困难，部分咳嗽，眼、鼻有浆液性或粘液性脓性分泌物，皮肤发绀，淋巴结、肾、胃肠粘膜明显出血，非洲猪瘟临床症状与猪瘟症状相似，只能依靠实验室监测确诊。

PCR技术因灵敏度高，特异性强，能够对非洲猪瘟病毒进行高效检测，是农业农村部指定的非洲猪瘟首选诊断技术。

非洲猪瘟快速诊断解决方案

不同类型样本采集及前处理：

1.血液样品：取全血或血清500ul，充分混匀，编号。

2.组织样品：取2g猪组织器官，剪碎，加入10ml生理盐水，充分研磨后转入1.5 mL离心管中编号备用。

3.血粉样品：取血粉约2g，加入10ml生理盐水混匀，编号备用。

4.环境样品：污水离心后取上清；刮取物加1ml生理盐水混匀，离心取上清

猪瘟病毒DNA提取：取处理液A 30µl于1.5ml灭菌离心管中，加入5ul待检样品震荡混匀，每管加入样本处理液B 30µl，震荡混匀，待检。

配置反应体系：

分别取混匀后20ulPCR反应液于不同1.5ml离心管中，分别加入5ul检测样品、阴性对照、阳性对照，混匀，离心。

上机检测：

将PCR管放入PCR仪，上机检测，结果分析。

结果成立条件：             

阳性对照：CT值＜32并有明显的扩增曲线。

阴性对照：无CT值或者CT值>38，线性为直线或者轻微斜线。

以上要求需同时满足，否则本次实验无效，需要重新进行。

苏州雅睿—非洲猪瘟定量PCR检测首选仪器

苏州雅睿MA-1620Q便携式实时荧光定量PCR仪。该款仪器配置3个荧光检测通道，标配16孔的检测通量，可通过内置触屏完成所有实验操作与结果分析。小巧的机身设计，功能强大，可用于相对定量，绝对定量，熔解曲线，阴阳性分析等。内置7寸高清电容屏PDA，触屏操作，简便快捷。

雅睿MA-1620Q便携式荧光定量PCR仪 ：16x0.2ml，兼容单管和8联管 

雅睿MA-688实时荧光定量PCR仪：48×0.2ml，适用0.2ml单管，8×0.2ml排管

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