Strep-Tactin 琼脂糖凝胶 FF 是一种将 Strep-Tactin 键合在琼脂糖凝胶微球上形成的生物亲和层析分离介质，主要用于纯化 Strep II 标签蛋白。Strep II 标签为 8 个氨基酸的小标签（WSHPQFEK），由于标签小，仅为 1 kDa 左右，一般不影响融合后蛋白质的结构和功能，常用于融合表达蛋白质的检测和纯化。

     本产品的配基 Strep-Tactin 是链霉亲和素（Streptavidin）的突变体，与链霉亲和素相比，Strep-Tactin 对 Strep II 标签的亲和能力至少强 10 倍以上，能够在温和的条件下与 Strep II 融合蛋白结合和解离。由于 Strep-Tacin 对 Strep II 标签具有高度特异性，一般一步纯化就能获得高纯度的蛋白质样品。

     Strep II 标签蛋白与凝胶结合后可使用脱硫生物素竞争方式进行洗脱，该洗脱方式比较温和，一般不会影响蛋白质的性质。如 Strep II 标签蛋白质能耐受碱性条件，也可用碱液洗脱，比如 10 mM NaOH 等。

     Strep-Tactin 琼脂糖凝胶 FF 能耐受较高的碱性条件，可以用 0.5 M NaOH 进行再生清洗和去除热源等。另外，2-(4-羟基苯唑)苯甲酸（HABA）也可用于凝胶再生，过量的 HABA 能以竞争的方式替换脱硫生物素，但在无 HABA 的缓冲液中， Strep-Tactin 与 HABA 会发生

解离，从而使 HABA 脱落，实现再生。

技术指标：

基质 4%琼脂糖凝胶微球

配基 Strep-Tactin

配基密度 ≥5 mg/ml

填料粒径 60 ~ 180 μm

最大流速 800 cm/h

推荐流速 20 ~ 100 cm/h

pH 稳定性 稳定性 短时间 pH 2 ~ 13；长时间 pH 4 ~ 11

耐反压 0.3 MPa

载量 ≥6 mg/ml Strep II 标签蛋白

使用方法：

1 推荐缓冲液 推荐缓冲液

纯化 纯化 Strep II 标签蛋白 标签蛋白

结合缓冲液：100 mM Tris-HCl，150 mM NaCl，1 mM EDTA，pH 8.0；

或 20 mM NaH 2 PO 4 ，280 mM NaCl，6 mM KCl，pH 7.4

洗脱缓冲液：结合缓冲液 + 2.5 mM 脱硫生物素；

或 10 mM NaOH

再生缓冲液：0.5 M NaOH；

或结合缓冲液+1 mM HABA

2 样品准备 样品准备

上柱的样品应尽量保持与结合缓冲液一致。通常可用透析、超滤、稀释等方法处

理样品。并且上柱前应过 0.45 μm 滤膜或高速离心去除不溶物。

3 样品纯化 样品纯化

3.1 平衡：取适量的 Strep-Tactin 琼脂糖凝胶 FF 装入合适的层析柱中，用蒸馏

水清洗5个柱体积去除保存液，再用结合缓冲液平衡5个柱体积，建议流速为100 cm/h。

3.2 上样：将准备好的样品上柱，建议流速为 20 ~ 100 cm/h，可根据实际结合

情况选择流速，能获得较好的效果。

3.3 再平衡：上样后用结合缓冲液平衡 10 个柱体积以上，或平衡至基线，洗去

杂质，推荐流速为 100 cm/h。

3.4 洗脱：用洗脱缓冲液洗 10 ~ 20 个柱体积，建议流速为 100 cm/h，收集的洗

脱液应立即调节 pH 至稳定范围，并根据需要置换缓冲液。

3.5 NaOH 再生：洗脱目的蛋白后的柱子用蒸馏水清洗 3 ~ 5 个柱体积，并用 0.5

M NaOH 再生 3 ~ 5 个柱体积，再用蒸馏水清洗至中性，用 20%乙醇保存柱子，或进

行下一次纯化。

3.6 HABA 再生：用脱硫生物素洗脱目的蛋白的，还可以用 HABA 缓冲液再生，

一般用 HABA 的结合缓冲液洗 15 个柱体积，再用结合缓冲液洗 30 个柱体积，然后可

以用 20%乙醇保存柱子，或进行下一步纯化。HABA 上柱后凝胶颜色会变为红橙色，

在结合缓冲液平衡后会恢复正常的白色，这种再生方式一般使用体积会大些。

规 格 ：20 ml，100 ml，1L，1 ml 预装柱，5 ml 预装柱，10 ml 预装柱，特殊规格订制

运 输 2 ~ 25℃，常压、避光

贮 存 20%乙醇，2 ~ 8℃

保质期 3 年