直接放于培养箱内,保证细胞稳定生长;
长时间监控活细胞样本,实时自动化获取成像和分析数据;
全自动 X-Y-Z 扫描,实时自动化聚焦,通道转换和拍摄;
多通道成像,包括红绿蓝和明场通道;
兼容各类常规培养容器,无需特殊耗材;
高清晰成像,配备科研级大尺寸 CCD(索尼 2/3 英寸,280 万像素);
Z-stack 多层成像,分析样品细节;
全自动大孔拼接成像(4×,10×,20×,6-384 孔板,培养皿,载玻片);
专用分析软件,可自动化生成生长曲线,影像资料和相关分析数据,;
操作简便,易学易用,适用实验室所有研究人员;
独特的选取视野位置方式,减少实验重复性;
多种成像方案,包括实时定点录像;叠加成像,矩阵成像,全孔成像,实时
成像,明场和荧光成像,预扫描成像;
可自动拍摄微流控芯片和细胞定位格子培养皿等;
可对 Fluidigm C1 芯片进行捕获点检查及评估捕获效率,便于后期单细胞测序;
Juli stage 应用
1、监控细胞增殖
细胞增殖是细胞生物学常规实验,juli stage 多功能细胞实时无标记分析仪提供自动化的成像
监控方法,可监测细胞形态上的变化,既可以无标记定量,又可以用荧光标定细胞核,
观察细胞核的大小及计数。
关键特点:
定量数据:1)由实时图像获得定量的动态的过程指标;2)指标为非侵入型,如单
层饱和度;3)标记指标(GFP 或 RFP 或 dapi 通道的活细胞染色)可进行细胞核计数;
4)所有动态信号均有图像和影片验证。
2、细胞毒性和活力检测
发生细胞毒性时,细胞膜会破裂,这时使用非渗透的染料,如 YOYO-1 等染料就可以将
发生细胞毒性的细胞染色,然后用 juli stage 进行观察。
关键特点:
1)使用核标记试剂 CellLight Nucleus-RFP,BacMam 2.0 或 Hoechst 等标记健康细胞细胞毒性染料 YOYO-1 标记发生毒性细胞,同时监测细胞增殖和细胞毒性;2)打破常规
方法固定时间点细胞活力或毒性检测的局限性,可以实时动态地记录细胞活性在不同生
理环境下的短期和长期的变化;3)自动数据获取:可在培养箱中自动收集相差图像和
荧光图像;4)自动量化随时间变换的细胞个数,单层汇合度,整孔汇合度,荧光强度
数据;5)高度可重复性:实时动态的细胞死亡记录是高度可重复的3、细胞迁移/侵袭实验
关键特点:1)可对各种原代细胞系和长生细胞系进行非标记的细胞迁移定量测定,包括 H
UVEC 细胞和肿瘤细胞系;2) 独特的孔内视野位置任意选择功能,保证所选择伤痕图片的质
量,减少实验重复性;节省不必要的耗材费用;3)自动定量测量相对伤口密度,细胞覆盖度,
划痕宽度;;并辅以图像和时序录像验证药理学作用;4)可用 RFP/GFPDAPI 通道荧光标记
细胞,定量监测共培养的细胞迁移和侵袭;5)可用 RFP/GFP/DAPI 通道标记细胞,定量监
测共培养的细胞迁移和侵袭;6)可配备 96 孔细胞迁移/侵袭 scratcher 套件,使用 96 孔划痕
器,仅需一个按钮,就可以在 96 孔微孔板上生成 96 个均匀一致的划痕,然后用 juli stage
记录划痕愈合实时动态全过程,同一块 96 孔微孔板中通过 4×、10×或 20×的物镜测量 2D
的细胞迁移和 3D 的细胞侵袭,并进行对比;并提供更丰富的基于时间推移的持续性图像采
集指标:相对伤口密度,细胞覆盖度,伤口覆盖度,划痕宽度,伤口闭合速度;
4、细胞凋亡
CellTrace 细胞增殖试剂盒含有细胞膜通透性非荧光酯,可通过扩散透过细胞膜进入细胞,并与
胺基反应形成荧光分子。这种无荧光的酯进入细胞后,可被胞内酯酶转化为荧光产物。活化的琥
珀酰亚胺酯与蛋白质中的胺基基团共价结合,使染料能够长时间保留在细胞中。经过后续细胞分
裂阶段,各个子代细胞会从母细胞中接收到荧光染料,因此可以长期指示细胞增殖情况;配合 C
aspase 3/7 细胞凋亡试剂(或 Annexin V EGFP/FITC 标记试剂)可以实时监测细胞凋亡;
关键特点:1)用 CellLight Nucleus-RFP,BacMam 2.0 慢病毒试剂标记健康细胞(也可以采
用 hoechst 染色活细胞,用 CellTrace violet cell proliferation kit),用 Caspase 3/7 试剂(或
Annexin V EGFP/FITC 标记试剂)标记凋亡细胞,同时监测细胞增殖和细胞凋亡; 2)用 4×、
10×或 20×物镜观察高清晰度相差图像,以确定细胞的死亡;3)可观察多种化合物和药物
对诱导细胞凋亡的作用。
5、3D 肿瘤
可跟踪和定量非贴壁的三维肿瘤球体的形成、生长和收缩,监控药物抑制肿瘤球体的情况;
关键特点:1)简单的 96-或 384-孔实验方案,使用低成本、圆底、低吸附性的微孔板;2)
软件可自动获取、分析图像,数据可导出计算 EC50 和 IC50;3)可在同一个孔中,用同样
的试剂平行进行 2D 和 3D 的实验;4)用荧光面积或荧光强度指标,监控和测量肿瘤球体随
时间的生长和收缩;5)可自动定量分析球体大小,周长,面积,体积等参数;
6、干细胞分化和单克隆筛选
可实时监控 IPS,多功能干细胞定向分化,单克隆筛选,用高清晰度全孔相差图像确认和跟
踪克隆的形成,可回溯以往的图像。
关键特点:1)可用高清晰度相差图像确认和跟踪克隆的形成,而无需将其取出培养箱,全
孔成像可观察到孔的边缘;2)可监控和计算转导效率和重编程效率; 3)降低人工成本,
提高工作效率;4)全孔图像可细节放大,以确认分化形态;5)快速浏览 96 孔板来确认克隆,
无需用显微镜一个个观察;2)用时序性图像可以确定克隆来源于单个细胞;6)高清晰度相
差成像可生成从 96 孔板到 35mm 培养皿的全孔图像,孔的边缘也能清楚看到; 7)可对克
隆进行快速孵育和扩张,并得到克隆的生长指标7、细胞周期检测
结合 Premo™ FUCCI 细胞周期指示剂(一种基于荧光蛋白的系统,它使用了与不同细胞周
期调控因子融合的红色 (RFP) 和绿色 (GFP) 荧光蛋白: cdt1 和 geminin。 在细胞周期的 G1
期,geminin 被降解,细胞核内呈现红色荧光。 在 S、G2 和 M 期,cdt1 被降解,细胞核呈绿
色荧光)研究活细胞的周期检测,对细胞分裂过程中所研究化合物的分布进行了详细的动力
学分析。
关键特点:1)基于图像定量分析细胞周期的方法,完整记录活细胞长时间内的细胞周期变化。
2)自动拍摄分裂过程关键时间节点的相差图像和荧标记图像及细胞分裂过程影像,自动定量分
析各周期分布中的荧光标记细胞数量;
8、免疫杀伤和聚集
免疫细胞能够识别并杀死肿瘤细胞是人宿主防御机制的关键组成之一。基于抗体的细胞介
导的细胞毒性(ADCC)和 T 细胞杀伤是细胞介导的免疫反应的两种机能。这两种过程都包
括:对免疫细胞群落(如自然杀伤细胞 NK 或有细胞毒性的 T 淋巴细胞 CTL)的刺激,然
后有活性地溶解目标细胞。理解免疫细胞和癌症细胞的相互作用,保持及促进免疫系统抗击
和消除肿瘤细胞的能力是目前研究的热点之一(“癌症免疫治疗”或”免疫肿瘤学“)。
关键特点:1)目标肿瘤细胞和免疫细胞(如 T 细胞,NK 细胞)共培养;2)通过加入免
洗的 Caspase3/7 凋亡试剂(或 YOYO-1 试剂等)直接检测肿瘤细胞的死亡;3)自动图像分析
可选择性地对肿瘤细胞死亡进行定量,通过 CellLight Nucleus-RFP, BacMam 2.0 慢病毒标记
试剂还可以对肿瘤细胞进行标记和计数,计算肿瘤细胞的增殖; 4)通过 Hoechst 核标记免
疫细胞,可监控免疫细胞的聚集效应;5)实时成像可揭示免疫细胞和癌症细胞间的动态的
相互作用,可分析细胞形态;6)可定量肿瘤细胞荧光强度显示杀伤效果;
图为 CART 杀伤 HEP3B(人肝癌)细胞研究图像及分析数据, 拍摄前培养基内加入 YOYO-1,
HEP3B 被 CART 细胞杀伤后表达绿色荧光,以 MOK-T 为对照孔,处理组分别为 GPC3-CART 组
和 GPC3-CART-8CD47(抗体)组;图 A, B,C 分别 juli stage 拍摄的 0h,15h,38h 不同处理
的杀伤效果图;可以明显看到相对于处理孔,GPC3-CART 组和 GPC3-CART-8CD47 组绿色荧光
明显增多,正常活性的癌细胞大幅减少,且前者癌细胞表达绿色荧光更为快速,最终残留的
癌细胞最少; D 为随时间变化的荧光强度曲线,可以很明显地看到,橙色曲线代表的
GPC3-CART 组荧光表达能力最强,最为快速,同样说明 GPC3-CART 组杀伤效果明显,而有抗
体的杀伤效果在初期并不明显,而后突破某个时间点后杀伤效果慢慢显现。
9、血管生成
血管新生是一种复杂、多步的过程,包括内皮细胞增殖、内皮细胞迁移和血管形成。用
20-amino-acid OPN peptide (OPNpt20)诱导人脐带血管内皮细胞(human vascular endothelial
cells,HUVECs),HUVEC 细胞就会有血管样结构生成,然后用 juli stage 进行观察。juli stage能监测血管生成的全过程,同时测定药物对血管生成的作用。关键特点:1)juli stage 软件可自动获取时序性图像,显示血管新生过程中的所有阶段的变
化;2)观察时间可长达 2 周, 3)提供血管长度、血管数量、血管面积和分支节点个数等
动态指标 5)能测量促血管生成和抗血管生成的作用;可研究复杂的通路,包括血管内皮生
长因子和非血管内皮生长因子信号介导的血管新生和血管分解;6)所有数据均有图像和动
态影像进行验证; 7)juli stage 可控制硬件系统进行 Z 轴多层成像的方式,通过软件三维
重建,得到三维血管生长的完整信息;