当我们纯化蛋白时,最重要的就是要保持蛋白在纯化过程中不能失活,或者是尽量降低纯化过程对蛋白活性带来的损失。这就意味着蛋白在整个纯化过程中要始终保持可溶性和活性。因此设计一个防止蛋白降解和聚合的蛋白纯化缓冲体系就非常重要了,尤其会凸显在实验结果上。在设计缓冲buffer时应考虑以下几个因素:pH值、缓冲体系、盐离子、还原剂和稳定剂。其中每一个因素都要根据你的目的蛋白进行优化,并以目的蛋...
活细胞工作站和激光扫描共聚焦显微镜的物镜镜头需要近距离的靠近被观察的样本。一般的细胞培养皿和培养板由于底面塑料或玻璃比较厚,不能适应物镜特别是油镜镜头做高倍镜观察。只有盖玻片的厚度能适合高倍物镜和油镜观察。市场上可选的用盖玻片厚度做为培养细胞的培养面的产品主要有腔室盖玻片系统,玻底培养皿,玻底培养板这几类。一般是用不同厚度的盖玻片或类似盖玻片的塑料片用胶水粘贴在一个特定形状的塑料框架或...
肿瘤是严重威胁人类生命和健康的重大疾病之一,相当时间里科学家对肿瘤的研究以细胞株或动物模型为主要对象,虽然取得一定的成绩,但是仍然存在如细胞株难以反映肿瘤的复杂微环境,动物模型难以重现人体内肿瘤的实际情况等普遍问题。手术切除的病人肿瘤组织不仅包含了病人本身的生物信息,还携带了医疗、饮食、区域等各种复杂的社会信息,是研究探索肿瘤发生、发展和转移机制最直接、最具体、最有价值的研究对象。将肿瘤组...
细胞为啥总是一言不合就抱团生长?!是细胞污染了还是正常现象?是消化不好了还是铺板有问题?抱团细胞越来越多,怎么样才能让细胞分开生长?请认真阅读以下干货,看看能否帮您答疑解惑!细胞抱团一定代表细胞状态不好吗?细胞生长的时候肯定是要相互联系,大部分的细胞都是要成片生长的,应该仔细观察每种细胞的状态,抱团并不一定代表不好:1. 若细胞轮廓清晰,可看清楚一个个的细胞,像葡萄一样,一串串的,就是状态好的,说...
症状1:细胞生长缓慢甚至死亡?被广泛使用的细胞培养基,不仅给细胞提供支持和养分,对于支原体而言,也是天堂一般的存在。与细胞培养高度重合的培养条件,注定了支原体要与细胞共同竞争有限的生存资源。早有研究表明[1],一些支原体(包括为常见的人型支原体、发酵支原体、精氨酸支原体等),通过精氨酸脱亚胺酶分解精氨酸来供能。当这些支原体混入细胞培养体系后,会与细胞争精氨酸,导致细胞「吃不饱饭」,出现营养不良的症...
玻璃化冻存技术是目前低温医学生物学领域研究的重要内容。近年来玻璃化冻存技术开始从生殖细胞领域转向应用于少量器官组织。上海交通大学医学院发表了一篇文章(见末尾附件),详细介绍了新型玻璃化冻存技术在活肿瘤组织样本库建设中的应用,该文章所述实验是在上海市赛立维生物科技有限公司(慧存医疗)研发中心和上海市肿瘤研究所共同完成。应用到了慧存医疗的组织运输液、组织冻存液与复苏液。 组织运输液:用...
首先siRNA由于只有二十几个碱基对,相比DNA几千上万对碱基,小了许多。目前大多数转染试剂都针对比较大的质粒DNA,而非小的RNA分子。用于转染DNA的转染试剂和方法并不完全适用于转染siRNA。其次,siRNA转染比DNA转染对转染试剂细胞毒性的要求严格。由于转染试剂对细胞的毒性往往是对众多基因直接地或间接地上调或下调的结果,这对于过量表达的DNA转染来说,一些实验的影响不大,但对于以研究基因...
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生物材料能否被打印这与所使用的三维打印机器有很大关系。不同的打印机对材料的要求不尽相同。在生物医学领域,主要使用的打印机分为四种类型:光固化立体印刷技术、熔融沉积打印技术、选择性激光烧结技术、直接浆料挤压技术。熔融沉积以及直接浆料挤压技术,是两种常用的制备骨组织工程支架的办法。直接打印的浆料有些是与水或者低沸点溶剂(二氯甲烷(DCM)、二甲亚砜(DMSO)混融的聚合物溶液,有些是在挤出后能快速挥发...
如今市场上在细胞培养及观察领域又出了新的耗材——玻底皿/板,这给细胞观察带来很大便利,在这里我就对它们做一些下详细的介绍。•玻底皿——简介 又称玻底皿,玻底皮氏皿,玻底微孔皿,玻底灭菌培养皿,盖玻片底皿,其结构特点是在塑料平皿的圆形底部中央打出一个直径1 cm左右的圆孔并从平皿底部的外面粘上一片厚度约为0.17mm透光性极好的盖玻片以密封圆孔配有平皿盖。使用时,将相配套的玻底皿支架放到...